全基因合成

时间:2021-09-28浏览次数:1598



【晶莱生物】以前,实验室通常用PCR和RT-PCR的方法来获取某个基因片段,但是往往因为标本和模板等原因无法钓取该段基因。如今,我们采用化学合成的方法人工构建基因片段,即:全基因合成拼接技术。可以为广大的科研朋友服务。
基因合成是指在体外合成双链DNA分子的一门技术,与寡核苷酸合成有所不同,寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50bp-12 kb。可根据客户需求,我公司可以提供全基因合成服务,速度快、周期短、价格优惠。合成的基因可以根据客户的需求连接到不同的载体上,最终提供的产品包括菌株以及冻干的质粒和全基因完整的测序报告。
 
全基因合成的适用范围:
1、自然界中无法以常规实验手段得到的基因。
2、研究人员通过自己的意愿设计基因序列,以得到自然界中不存在的基因。
3、对已知基因序列进行大量密码子优化重排,以期达到对该基因进行高效表达或获得新的生物特性等研究目的。
 
服务优势:
1、合成基因最长已达到10.5KB,已完成基因超过10000条。
2、可以合成重复序列(重复次数无限制).高GC(小于80%).发夹(参照每200bp小于3个发夹为限).连续单一碱基重复(GC小于15个,AT小于20个)等富含特殊结构的基因注:特殊结构基因合成的相关数据是根据我公司曾经成功合成过的基因序列所做的总结,以作为您设计基因序列时判断是否能顺利合成作为参考,具体还需以实际基因序列来定。
3、基因可以克隆到客户提供或指定的表达载体上。
4、免费提供基因结构设计.基因密码子优化,基因克隆表达方案设计等基因合成相关咨询服务。
 
全基因合成操作程序:
1、我们将对您需要合成的基因全序列进行分析,检查基因内部是否含有重复序列,然后根据序列的具体情况设计合成方案。
2、在得到您认可后,我们将立即进行单链Oligo DNA 合成,DNA片段拼接等工作。然后把全长基因克隆到载体中,再通过DNA测序确认合成基因的正确性。
3、测序结果如果发现有错误位点,我们会采取相应的技术手段进行修复校对,保证整个序列的正确性。
 
注:因基因结构比较复杂,并非所有的片段都能顺利合成。对于较长的片段或一些复杂结构如重复序列、高GC 片段等,可能会需要额外的时间调整合成方案。如果发生这种情况,技术人员会及时与您联系,告知您合成进程。 所合成的基因一般克隆于通用载体中,如需克隆在客户指定的载体中,我公司会酌情再收取一定的费用,并且交货时间会适当延长。
 
 服务要求:

1、请您以EMAIL的形式提供需要合成的基因的序列。
2、请您说明实验的具体要求:
      如:使用何种酶切位点,进行克隆,以及需要克隆到何种载体等。
3、本中心将免费提供PUC57-T载体,如果需要装在其它载体中,请客户自已提供。
4、签订基因合成技术保密协议,支付合成总价的50%作为预付款,本公司收到款项后开始合成基因注:基因合成开始日期为公司确认收到预付款后的第一个工作日
5、基因合成结束,通知客户支付余下50%的合成款项

结果提供:
1、 基因合成报告单一份
2、含目的基因的质粒(不少于1ug)一份
3、含目的基因的菌株一份
4、基因合成的测序图谱一份

晶莱生物服务流程


晶莱生物实验服务项目

动物实验细胞生物学病理实验
消化系统模型细胞培养病理染色
胃酸分泌模型普通细胞株HE染色
脓毒症模型细胞缺氧培养油红O染色
胃溃疡模型细胞培养+支架番红固绿染色
胰腺炎模型干细胞培养Masson染色
肝纤维化模型原代细胞分离/提取/培养天狼猩红染色
DIO肥胖模型细胞转染/病毒感染PAS糖原染色
胆结石模型Trans well共培养阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型细胞增殖甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型细胞计数尼氏染色
急性肝损伤模型生长曲线测定LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型存活曲线测定普鲁士蓝染色
骨质疏松模型ccK-8增殖检测VG染色
糖尿病模型MTT增殖检测EVG染色
高尿酸血症模型CFSE检测增殖-流式检测VonKossa染色
呼吸系统模型BrDU检测-免疫荧光法刚果红染色
肺纤维化模型细胞凋亡苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型Annexin V/PI流式检测细胞凋亡Trap染色
急性肺损伤模型WB检测凋亡相关蛋白抗酸染色
哮喘模型透射电镜观察凋亡小体革兰氏染色
肺栓塞模型Tunel染色(POD法,DAB显色)AB-PAS染色
支气管炎模型Tunel(荧光法,含试剂盒)亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型DNA ladder法苯胺蓝染色
慢性肾衰模型细胞周期荧光 DAPI染色
急性肾衰模型细胞显微计数普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型PI染色间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型BrdU渗入法银染
肾炎模型免疫荧光染色黑色素染色
子宫内膜异位症模型PI流式检测细胞周期镀银染色
心血管系统模型细胞运动PASM 六胺银染色
冠心病模型Transwell检测细胞迁移VG染色
心肌梗死模型Transwell检测细胞侵袭富尔根染色
心脏骤停模型细胞划痕亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型细胞克隆碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型集落形成法/稀释铺板方法Goldner三色法染色
白血病模型软琼脂克隆法PAS-萘酚磺S染色
高血压模型毛细管克隆法改良苯酚品红染色
神经系统模型体外实验血管生成网状纤维染色
脑卒中模型磁珠分选细胞β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型流式分选细胞镀银染色
脑出血模型开机费movat五色染色
脑损伤模型单色维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型双色免疫组化
帕金森模型CBA多细胞因子流式检测免疫组化预式
老年痴呆模型组织/血液细胞制备免疫组化正式
应激模型组织单细胞制备免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型中性粒细胞提取免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型其他样本细胞制备(如血液等)免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型外周血PBMC分离免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型线粒体组学免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型线粒体膜电位检测-流式法制片前处理
五官疾病模型线粒体膜电位检测-免疫荧光法石蜡组织包埋
眼科疾病模型线粒体ROS生物含量检测--流式特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型线粒体通透性转换孔(mPTP)骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型溶酶体免疫荧光法骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型线粒体+溶酶体共定位骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型内质网骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型线粒体钙瞬时变化检测-流式石蜡白片
皮下植瘤模型ATP检测细胞爬片

ADP检测

AMP检测



流式DNA/RNA半定量检测基因编辑工具
组织细胞悬液处理pcr检测mRNA合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理microRNA检测质粒载体构建
血液标本处理LncRNA表达量的检测过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养CirRNA表达量的检测shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测凝胶电泳过表达慢病毒载体构建包装
双色检测基因合成shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡<300过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期300-1,500shRNA腺病毒载体构建包装

1500 - 5000稳转细胞株

>5000

特殊序列



ELISAWBqPCR
组织匀浆处理蛋白提取及定量一RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kitWB检测一(10孔膜/指标)mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit灰度值分析及作图一(10孔膜/指标)miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit蛋白提取及定量二LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kitWB检测二(10孔膜/指标)CircRNA引物设计及合成

灰度值分析及作图二(10孔膜/指标)mRNA RT-qPCR


miRNA RT-qPCR


LncRNA RT-qPCR


CircRNA RT-qPCR



收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电咨询!

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【平台项目开展范围】慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导等服务。


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