【血清常见问题解答】内毒素对细胞培养的影响！
时间：2025-04-21 阅读：120
内毒素：内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖。 脂多糖对宿主是有毒性的。虽然内毒素紧密地嵌入细胞壁中，但也会不断地向周围环境释放内毒素，这种释放不仅仅是因为细胞的解体和死亡造成的，也会发生在正常细胞生长和分裂过程中。
内毒素不是蛋白质，因此非常耐热。在 100℃的高温下加热 1 小时也不 会被破坏，只有在 160℃的温度下加热 2 到 4 个小时，或用强碱、强酸或强 氧化剂加温煮沸 30 分钟才能破坏它的生物活性。与外毒素不同之处在于：内毒素不能被稀甲醛溶液脱去毒性成为类毒素；把内毒素注射到机体内虽可产生一定量的特异免疫产物 (称为抗体) ，但这种抗体抵消内毒素毒性的作用微弱。
1. 细胞形态
内毒素可以改变细胞的外形，例如肝细胞外形改变并引发其吸收六碳糖 的能力降低。在含有内毒素的培养基中培养细胞时，细胞形态会发生明显变 化，如细胞体积缩小、细胞折光性降低。
2. 激活免疫反应
内毒素可以与细胞膜上的受体结合，引起免疫反应，激活组织内的炎性 细胞和炎症因子的释放。它还可能触发细胞的炎症反应，影响细胞的生长、 健康和实验结果。
3. 影响细胞功能
内毒素对细胞的功能有显著影响，包括改变细胞的能量代谢和蛋白质合 成。此外，内毒素还可以干扰胰岛素的信号转导途径，从而影响细胞的能量 代谢和蛋白质合成。
4. 影响细胞生长
内毒素对细胞的生长和功能有负面影响，尤其是在细胞培养过程中，可 能导致实验中的错误结论。不同内毒素和不同细胞系之间的毒性程度各不相 同。
5. 影响基因表达
内毒素可以刺激白细胞培养物产生组织因子、激活鼠巨噬细胞，以及通 过极低水平的内毒素抑制鼠类红细胞集落形成等一系列指标。
6. 影响转染效率
内毒素会对原代细胞和敏感培养细胞的 DNA 转染过程造成重要影响，高 内毒素会与 DNA 竞争转染试剂，从而减少质粒 DNA 的摄取量，导致转染效 率下降。
内毒素在不同细胞系中的毒性程度存在显著差异。一些细胞系对内毒素 的敏感性非常高，甚至在内毒素浓度低于 1 ng/mL 的情况下就会表现出失调 现象。例如，癌性肠上皮细胞 T84 和 Caco-2 对内毒素不具有反应性，而 SW620 和 HT29 细胞在内毒素刺激下能分泌 IL-8 等细胞因子。此外，一些历史悠久 的细胞系如 HeLa和 CHO 细胞，随着时间的推移可能被自然选择为耐内毒素。
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