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重磅上新|人源 iPSC 多能性质量评价体系,助力干细胞分化与类器官研究

时间:2026-10-16 阅读:122
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诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)是干细胞定向分化、疾病模型和类器官构建的重要起始细胞。对于后续实验而言,起始 iPSC 是否处于良好的未分化状态、是否维持多能性相关标志物表达,以及是否具备代表性的体外分化潜能,直接影响后续分化体系的一致性和可重复性。

基于现有 iPSC 质控数据,晶莱生物类器官研究中心建立了由“形态学观察 + 多能性相关标志物免疫荧光 + SSEA4 流式定量 + 体外三胚层代表性分化验证”组成的多维度质量评价流程,可用于 iPSC 起始状态评估及后续定向分化、类器官构建前的质量控制。



01 典型集落样形态,为 iPSC 基础质控提供第一层证据


明场观察显示,细胞以紧密集落样方式生长,集落区域连续、细胞排列较为致密,整体呈现未分化 iPSC 培养中常见的集落形态特征。

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图 1|人源 iPSC 明场形态学观察(原始质控数据)



02 NANOG / OCT4 / SOX2 阳性,支持多能性相关分子表型


免疫荧光结果显示,iPSC 集落区域可见 NANOG、OCT4 和 SOX2 阳性信号。三者均为 iPSC 多能性状态评价中常用的核心相关标志物。本批次结果从多个标志物维度鉴定了细胞的多能性相关分子表型。

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图 2A|DAPI / NANOG 免疫荧光鉴定

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图 2B|DAPI / OCT4 免疫荧光鉴定



03 SOX2 与 SSEA4 联合评价,补充未分化状态与群体一致性信息


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图 3A|DAPI / SOX2 免疫荧光鉴定


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图 3B|DAPI / SSEA4 免疫荧光鉴定

SSEA4 为 iPSC 质量评价中常用的细胞表面多能性相关标志物。免疫荧光结果显示 SSEA4 阳性信号,与 NANOG、OCT4、SOX2 的检测结果共同构成对未分化状态的多维度支持。



04 SSEA4 流式定量:本批次阳性比例 99.3%


除免疫荧光观察外,本批次样本进一步采用流式细胞术对 SSEA4 阳性比例进行定量。结果显示,SSEA4 阳性比例为 99.3%。该结果可用于补充评估细胞群体中 SSEA4 阳性细胞的占比,为后续分化实验的起始细胞状态提供定量参考。

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图 4|SSEA4 流式细胞术定量结果:本批次阳性比例 99.3%

 (数据仅为体外细胞实验质控指标,仅限科研参考,非临床指标)



05 体外三胚层代表性分化,支持 iPSC 分化潜能


在体外分化能力验证中,可见 α-SMA、SOX17 和 βIII-Tubulin 相关阳性信号。结合本次实验设计,这三组指标分别用于支持中胚层相关、内胚层相关以及外胚层/神经谱系相关分化表型,表明该批次 iPSC 具备向不同胚层代表性谱系分化的潜能。

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图 5|iPSC 体外三胚层代表性分化能力验证:α-SMA、SOX17、βIII-Tubulin

结果解读:上述结果支持代表性三胚层分化潜能;但具体目标谱系仍需结合相应专属标志物与功能指标进一步评价。



06 建立多维度 iPSC 起始细胞质控,为后续模型构建提供基础


将形态学、多个多能性相关标志物、SSEA4 群体定量以及体外代表性分化潜能结合,可从不同层面评价 iPSC 起始状态。


适用研究方向:

•  iPSC 日常培养状态与多能性相关表型质量评价

•  神经、心肌、肝、肾、肠等定向分化实验的起始细胞质控

•  脑类器官、心脏类器官及其他 iPSC 来源类器官构建前质量评价

•  临床样本来源或基因编辑 iPSC 后续疾病模型研究的起始状态确认

•  不同批次 iPSC 培养及分化实验的一致性对照与过程记录



适用服务模块


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结语


本次人源 iPSC 多能性质量评价体系的完善,进一步补充了平台在 iPSC 起始细胞质控、定向分化及类器官模型构建方向的技术链条。基于现有数据,可开展形态学观察、多能性相关标志物免疫荧光、SSEA4 流式定量及体外代表性三胚层分化验证,为后续研究提供更清晰、可追溯的起始细胞质量评价依据。


用途说明:本服务用于科研服务与体外研究支持。质控结果应结合具体细胞系背景、培养批次及后续实验目的进行综合解释。


关于晶莱


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晶莱生物创立于2016年,拥有北京(北京晶莱华科生物技术有限公司)及长沙(湖南晶莱生物技术有限公司)两个研发机构,是专注于生物医药临床前研发与基础医学科研服务的国家高新技术企业及专精特新企业。依托北京、长沙两地的3000余平实验平台,晶莱构建了8个研究平台,可为客户提供包括临床前CRO、类器官模型构建、动物寄养、动物模型构建、细胞型构建、药效及各类表型、机制、通路等全方位的研究服务。


截至目前,晶莱生物已与国内超过1000家生物医药公司、高校及医院建立了紧密的合作关系,成功实施了10000余项研究/研发项目,积累了超过100000+客户。


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