时间：2021-09-29浏览次数：2886
肾癌（肾细胞癌，RCC）的动物模型是研究其发病机制、药物筛选及疗效评估的重要工具。不同造模方法模拟了肾癌的不同亚型（如透明细胞癌、乳头状癌等）和病理特征。以下从 自发性模型、诱发性模型、基因工程模型、移植模型 四类主流方法展开，结合机制通路、关键蛋白及临床研究进行详细阐述。
一、自发性模型（Spontaneous Models）
1. 造模方法
Eker大鼠模型：由Tsc2基因（结节性硬化症基因）自发突变导致，约30%的雌性大鼠在1年内发生肾癌。
其他物种：某些犬类（如德国牧羊犬）因遗传倾向自发形成肾癌。
2. 机制通路与关键蛋白
mTOR通路：Tsc2基因突变导致mTOR信号过度激活，驱动细胞增殖和血管生成。
关键蛋白：TSC2（肿瘤抑制蛋白）、mTORC1复合体、S6K1/4E-BP1（下游效应分子）。
HIF-α通路：部分模型因缺氧模拟透明细胞癌的VHL缺失表型。
3. 临床关联
mTOR抑制剂（如依维莫司、替西罗莫司）在临床试验中用于晚期肾癌，与模型验证的机制一致。
局限性：自发模型周期长（>12个月），难以大规模应用。
二、诱发性模型（Chemically Induced Models）
1. 造模方法
N-亚硝基二乙胺（DEN）：通过腹腔注射或饮水给药，诱导大鼠/小鼠肾近曲小管癌。
铁-亚硝基三乙酸（FeNTA）：特异性诱导小鼠近端肾小管氧化损伤，模拟肾癌发生。
2. 机制通路与关键蛋白
氧化应激与DNA损伤：FeNTA通过Fenton反应产生活性氧（ROS），激活NF-κB和STAT3通路。
关键蛋白：CYP450（代谢活化DEN）、8-OHdG（DNA氧化损伤标志物）、Keap1/Nrf2（抗氧化通路）。
Wnt/β-catenin通路：部分模型中β-catenin核积累驱动肿瘤进展。
3. 临床关联
抗氧化剂（如NAC）在临床前试验中延缓肿瘤发生，但临床转化效果有限。
适用性：适用于研究环境致癌物与肾癌的关系，但病理类型单一（多为乳头状癌）。
三、基因工程模型（Genetically Engineered Models, GEMs）
1. VHL基因敲除模型
造模方法：条件性敲除肾小管上皮细胞的VHL基因（模拟透明细胞癌的VHL失活）。
机制通路：
HIF-α通路：VHL缺失导致HIF-1α/2α无法降解，激活VEGF、PDGF、GLUT1等促血管生成基因。
关键蛋白：VHL、HIF-1α/2α、VEGF-A、CAIX（碳酸酐酶IX）。
临床关联：
抗血管生成药物（贝伐珠单抗、舒尼替尼）的疗效验证。
HIF-2α抑制剂（Belzutifan）获FDA批准用于VHL综合征相关肾癌。
2. MET突变模型
造模方法：过表达MET突变体（如Hereditary Papillary RCC相关的MET突变）。
机制通路：
MET/PI3K/AKT通路：MET持续激活促进细胞迁移和存活。
关键蛋白：MET受体、Gab1、PI3K、AKT。
临床关联：
MET抑制剂（卡博替尼、Foretinib）在临床试验中对乳头状肾癌有效。
3. 复合基因模型（如VHL/p53双敲除）
模拟晚期肾癌的侵袭性，用于研究肿瘤微环境（如缺氧、免疫抑制）。
四、移植模型（Xenograft/PDX Models）
1. 细胞系移植（CDX）
常用细胞系：786-O（VHL缺失）、Caki-1（转移性透明细胞癌）。
造模方法：皮下或原位（肾包膜下）注射人源肾癌细胞至免疫缺陷小鼠（如裸鼠、NSG）。
机制通路：依赖移植细胞的遗传背景（如786-O的HIF-2α高表达）。
临床关联：用于快速评估化疗药（如吉西他滨）或靶向药（如阿昔替尼）的敏感性。
2. 患者来源异种移植（PDX）
优势：保留患者肿瘤的异质性和微环境特征。
关键蛋白：PD-L1（用于免疫治疗研究）、CD44（肿瘤干细胞标志物）。
临床关联：指导个体化治疗（如PD-L1阳性患者对纳武利尤单抗响应更佳）。
五、模型选择与临床转化
六、总结与展望
趋势：人源化免疫系统小鼠（Hu-mice）联合PDX模型用于免疫治疗研究。
挑战：模拟肾癌转移微环境（如骨、肺转移）的模型仍需优化。
新技术：CRISPR-Cas9构建多基因突变模型，类器官模型用于高通量筛选。
通过合理选择模型，可深入解析肾癌的分子机制并加速临床转化，例如针对HIF-VEGF通路的药物已显著改善患者生存，而基于PDX模型的个体化治疗正在改变临床实践。
裸鼠是随着近代医学的发展，特别是肿瘤学和免疫学研究的需要，在近十几年中发展起来的动物模型。由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情况下，不排斥来自异种动物的组织移植，因此，可用其建立理想的人类肿瘤可移植实验动物肿瘤模型。人体肿瘤移植于免疫缺陷动物（裸鼠），能保持其生物学特性，用于研究人体肿瘤对药物的敏感性有很大帮助。利用裸鼠建立肿瘤模型（即裸鼠成瘤）进行肿瘤的防治研究，是基础医学研究中的重要课题。
晶莱可根据客户具体需求建立各种肿瘤、肿瘤转移动物模型，同时提供给药实验、药物药理、药效评价及药代动力学分析，协助客户研究肿瘤发生发展的机制、寻求预防和治疗肿瘤的新型药物。
应用范畴：
1.评价抗肿瘤免疫治疗的疗效
2.作为抗肿瘤药物筛选模型
3.为肿瘤转移研究提供更好的研究平台
4.为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具
服务内容：
裸鼠的购买，饲养，造模、取材，和后续指标的检测等。
肿瘤模型（皮下移植瘤、原位癌）：
| 乳腺癌 | 肺癌 | 结肠癌 | 胃癌 | 肝癌 | 白血病 |
| 淋巴瘤 | 皮肤癌 | 前列腺癌 | 食管癌 | 宫颈癌 | 卵巢癌 |
| 人绒毛膜癌 | 口腔癌 | 肾癌 | 膀胱癌 | 胰腺癌 | 大肠癌 |
交付标准：
整套的动物模型构建，动物饲养，标本采集和指标检测的实验服务，提供详细的动物实验报告单。
晶莱生物服务流程
晶莱生物实验服务项目
| 动物实验 | 细胞生物学 | 病理实验 |
| 消化系统模型 | 细胞培养 | 病理染色 |
| 胃酸分泌模型 | 普通细胞株 | HE染色 |
| 脓毒症模型 | 细胞缺氧培养 | 油红O染色 |
| 胃溃疡模型 | 细胞培养+支架 | 番红固绿染色 |
| 胰腺炎模型 | 干细胞培养 | Masson染色 |
| 肝纤维化模型 | 原代细胞分离/提取/培养 | 天狼猩红染色 |
| DIO肥胖模型 | 细胞转染/病毒感染 | PAS糖原染色 |
| 胆结石模型 | Trans well共培养 | 阿利新蓝染色 |
| 结肠炎(UC)模型 | 细胞增殖 | 甲苯胺蓝染色 |
| 脂肪肝模型 | 细胞计数 | 尼氏染色 |
| 急性肝损伤模型 | 生长曲线测定 | LFB髓鞘染色 |
| 免疫、代谢系统疾病模型 | 存活曲线测定 | 普鲁士蓝染色 |
| 骨质疏松模型 | ccK-8增殖检测 | VG染色 |
| 糖尿病模型 | MTT增殖检测 | EVG染色 |
| 高尿酸血症模型 | CFSE检测增殖-流式检测 | VonKossa染色 |
| 呼吸系统模型 | BrDU检测-免疫荧光法 | 刚果红染色 |
| 肺纤维化模型 | 细胞凋亡 | 苏丹黑B染色 |
| 慢性肺阻塞模型 | Annexin V/PI流式检测细胞凋亡 | Trap染色 |
| 急性肺损伤模型 | WB检测凋亡相关蛋白 | 抗酸染色 |
| 哮喘模型 | 透射电镜观察凋亡小体 | 革兰氏染色 |
| 肺栓塞模型 | Tunel染色(POD法,DAB显色) | AB-PAS染色 |
| 支气管炎模型 | Tunel(荧光法,含试剂盒) | 亚甲基蓝染色 |
| 泌尿生殖系统模型 | DNA ladder法 | 苯胺蓝染色 |
| 慢性肾衰模型 | 细胞周期 | 荧光 DAPI染色 |
| 急性肾衰模型 | 细胞显微计数 | 普鲁士蓝染色 |
| 肾间质纤维化模型 | PI染色 | 间苯二酚碱性品红染色 |
| 肾结石模型 | BrdU渗入法 | 银染 |
| 肾炎模型 | 免疫荧光染色 | 黑色素染色 |
| 子宫内膜异位症模型 | PI流式检测细胞周期 | 镀银染色 |
| 心血管系统模型 | 细胞运动 | PASM 六胺银染色 |
| 冠心病模型 | Transwell检测细胞迁移 | VG染色 |
| 心肌梗死模型 | Transwell检测细胞侵袭 | 富尔根染色 |
| 心脏骤停模型 | 细胞划痕 | 亚甲基蓝染色 |
| 慢性心力衰竭模型 | 细胞克隆 | 碘-碘化钾染色 |
| 动脉粥样硬化模型 | 集落形成法/稀释铺板方法 | Goldner三色法染色 |
| 白血病模型 | 软琼脂克隆法 | PAS-萘酚磺S染色 |
| 高血压模型 | 毛细管克隆法 | 改良苯酚品红染色 |
| 神经系统模型 | 体外实验血管生成 | 网状纤维染色 |
| 脑卒中模型 | 磁珠分选细胞 | β-半乳糖苷酶染色 |
| 栓塞性脑梗死模型 | 流式分选细胞 | 镀银染色 |
| 脑出血模型 | 开机费 | movat五色染色 |
| 脑损伤模型 | 单色 | 维多利亚蓝染色 |
| 脊髓损伤模型 | 双色 | 免疫组化 |
| 帕金森模型 | CBA多细胞因子流式检测 | 免疫组化预式 |
| 老年痴呆模型 | 组织/血液细胞制备 | 免疫组化正式 |
| 应激模型 | 组织单细胞制备 | 免疫荧光（石蜡-单标） |
| 骨骼疾病模型 | 中性粒细胞提取 | 免疫荧光（石蜡-双标） |
| 骨折模型 | 其他样本细胞制备（如血液等） | 免疫荧光（石蜡-三标） |
| 骨缺损模型 | 外周血PBMC分离 | 免疫荧光（冰冻-单标） |
| 风湿免疫性关节炎模型 | 线粒体组学 | 免疫荧光（冰冻-双标） |
| 骨关节炎模型 | 线粒体膜电位检测-流式法 | 制片前处理 |
| 五官疾病模型 | 线粒体膜电位检测-免疫荧光法 | 石蜡组织包埋 |
| 眼科疾病模型 | 线粒体ROS生物含量检测--流式 | 特殊包埋（细胞、材料、眼球等） |
| 鼻腔疾病模型 | 线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光 | 软化（肝硬化、皮肤结痂、植物等） |
| 皮肤疾病模型 | 线粒体通透性转换孔（mPTP） | 骨组织脱钙（小） |
| 皮肤损伤模型 | 溶酶体免疫荧光法 | 骨组织脱钙（大） |
| 肿瘤疾病模型 | 线粒体+溶酶体共定位 | 骨组织EDTA脱钙（小） |
| 原位瘤模型 | 内质网 | 骨组织EDTA脱钙（大） |
| 转移瘤模型 | 线粒体钙瞬时变化检测-流式 | 石蜡白片 |
| 皮下植瘤模型 | ATP检测 | 细胞爬片 |
| ADP检测 | ||
| AMP检测 | ||
| 流式 | DNA/RNA半定量检测 | 基因编辑工具 |
| 组织细胞悬液处理 | pcr检测mRNA | 合成（3保1）片段/质粒/引物合成 |
| 细胞处理 | microRNA检测 | 质粒载体构建 |
| 血液标本处理 | LncRNA表达量的检测 | 过表达腺病毒载体构建包装 |
| 细胞刺激培养 | CirRNA表达量的检测 | shRNA腺病毒载体构建包装 |
| 单色检测 | 凝胶电泳 | 过表达慢病毒载体构建包装 |
| 双色检测 | 基因合成 | shRNA慢病毒载体构建包装 |
| Annexin V/PI凋亡 | ＜300 | 过表达腺相关病毒载体构建包装 |
| 细胞周期 | 300-1,500 | shRNA腺病毒载体构建包装 |
| 1500 - 5000 | 稳转细胞株 | |
| >5000 | ||
| 特殊序列 | ||
| ELISA | WB | qPCR |
| 组织匀浆处理 | 蛋白提取及定量一 | RNA抽提 |
| ELISA（不含试剂盒）48T/kit | WB检测一（10孔膜/指标） | mRNA引物设计及合成 |
| ELISA（不含试剂盒）96T/kit | 灰度值分析及作图一（10孔膜/指标） | miRNA引物设计及合成 |
| ELISA（含国产试剂盒）48T/kit | 蛋白提取及定量二 | LncRNA引物设计及合成 |
| ELISA（含国产试剂盒）96T/kit | WB检测二（10孔膜/指标） | CircRNA引物设计及合成 |
| 灰度值分析及作图二（10孔膜/指标） | mRNA RT-qPCR | |
| miRNA RT-qPCR | ||
| LncRNA RT-qPCR | ||
| CircRNA RT-qPCR |
收费标准/服务周期/提供结果：
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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